Utilização da morfometria celular no microambiente neoplásico e sua relação com a imunoexpressão da interleucina-4 / Use of cellular morphometry in the neoplastic microenvironment and its relationship with the immunoexpression of interleukin-4

A morfometria celular é um tipo de análise quantitativa que utiliza as medidas geométricas para obter informações acerca da morfologia nuclear, citoplasmática e outras medidas gerais das células, sendo que estes parâmetros podem estar alterados devido a processos fisiológicos e patológicos que modificam a morfologia celular normal, sendo uma análise relevante no prognóstico de diversas lesões. Os ceratinócitos possuem morfologia poliédrica com núcleos ovoides, mas podem sofrer alterações com eventos patológicos e fisiológicos, por exemplo, no núcleo. Essas alterações podem estar presentes em neoplasias malignas, como, no carcinoma epidermoide. A interleucina-4 (IL-4) é uma citocina secretada por diversos tipos de células, estando envolvida no desenvolvimento e diferenciação de células Th2, atuando na resposta antiinflamatória e sua expressão parece estar relacionada com o desenvolvimento de algumas neoplasias, incluindo o câncer oral. O objetivo da pesquisa foi realizar análise morfométrica celular (compartimentos nuclear e citoplasmático), identificação de irregularidades nucleares de ceratinócitos malignos e comparar com a imunoexpressão da IL-4 e profundidade de invasão nos casos de Carcinoma Epidermoide de Lábio Inferior (CELI) e Língua Oral (CELO). Foram analisados 30 casos de cada lesão. Para morfometria celular foram analisados 16 ceratinócitos malignos por caso; a imunoexpressão de IL-4 foi analisada no parênquima e estroma das lesões, utilizando softwares de análises de imagens. Foram aplicados os testes estatísticos de Análise de Variância, Kruskal-Wallis e Correlação de Spearman. A imunoexpressão de IL-4 no parênquima foi maior nos casos de CELI em todos os campos analisados (p<0,05); Houve correlação positiva entre área celular total e profundidade de invasão (p=0,038) e negativa entre imunoexpressão da IL-4 no parênquima superficial e perímetro nuclear superficial (p=0,007). Portanto, sugere-se que exista uma relação protetora da imunoexpressão IL-4 com as lesões analisadas, bem como alterações morfométricas dos ceratinócitos malignos com a imunoexpressão da IL-4 nessas lesões (AU).

Cell morphometry is a type of quantitative analysis that uses geometric measurements of cells to obtain information about the nuclear, cytoplasmic and general morphology of cells. Such parameters may be altered due to physiological and pathological processes that modify normal cell morphology, being a relevant analysis in the prognosis of several injuries. Keratinocytes have a polyhedral morphology with ovoid nuclei, but may undergo changes with pathological and physiological events, for example, in the nucleus. These changes may be present in malignant neoplasms, such as squamous cell carcinoma. Interleukin-4 (IL-4) is a cytokine secreted by several types of cells, being involved in the development and differentiation of Th2 cells, acting in the anti-inflammatory response and its expression seems to be related to the development of some neoplasms, including the oral cancer. The objective of the research was to perform cellular morphometric analysis (nuclear and cytoplasmic compartments), identification of nuclear irregularities of malignant keratinocytes and compare with the immunoexpression of IL-4 and depth of invasion in cases of Epidermoid Carcinoma of the Lower Lip (CELI) and Oral Tongue. (CELLO). Thirty cases of each lesion were analyzed. For cell morphometry, 16 malignant keratinocytes were analyzed per case; IL-4 immunoexpression was analyzed in the parenchyma and stroma of the lesions, using image analysis software. The statistical tests of Analysis of Variance, Kruskal-Wallis and Spearman's Correlation were applied. The immunoexpression of IL-4 in the parenchyma was higher in cases of CELI in all analyzed fields (p<0,05); There was a positive correlation between total cell area and depth of invasion (p=0.038) and a negative correlation between IL-4 immunoexpression in the superficial parenchyma and superficial nuclear perimeter (p=0.007). Therefore, it is suggested that there is a protective relationship between IL-4 immunoexpression and the lesions analyzed, as well as morphometric alterations of malignant keratinocytes with IL-4 immunoexpression in these lesions (AU).

Dlx5 promotes cancer progression through regulation of CCND1 in oral squamous cell carcinoma (OSCC).

Genetic studies have revealed a critical role of the distal-less homeobox gene 5 (Dlx5) in the pathogenesis of ovarian cancer, lung cancer, and T-cell lymphoma; however, the role and underlying mechanisms of Dlx5 in oral squamous cell carcinoma (OSCC) are largely unknown. In this study, we demonstrated that Dlx5 is up-regulated in OSCC tissues and cell lines, compared with their control groups. The results from our immunohistochemistry (IHC) analyses show that high expression levels of Dlx5 correlated with advanced TNM stages (P = 0.0001), lymph node metastasis (P = 0.0049), poor cellular differentiation (P = 0.0491), location of the tumors (P = 0.0132), and poor prognosis for the patient. We also demonstrated that knockdown of Dlx5 inhibited the viability, proliferation, and colony formation of OSCC cell lines CAL-27 and WSU-HN6 cells, probably by blocking cell cycle in the G1 phase. Furthermore, we revealed that Dlx5 exerts its biological functions via direct regulation of CCND1 in CAL-27 and WSU-HN6 cells. Ultimately, we have demonstrated that silencing of Dlx5 inhibits the growth of xenograft tumors in vivo, and that Dlx5 affects the progression of OSCC both in vitro and in vivo via directly regulating CCND1, providing a potential diagnostic biomarker and therapeutic target for OSCC.

MicroRNA-378-3p/5p suppresses the migration and invasiveness of oral squamous carcinoma cells by inhibiting KLK4 expression.

Distant metastasis frequently occurs in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and contributes to the adverse prognosis for patients with OSCC. However, the potential mechanisms behind the metastasis have not yet been clarified. This study investigated the role of miR-378 in the migration and invasiveness of OSCC in vitro and in vivo. According to our results, the migration and invasiveness of OSCC cells were increased in cells overexpressing miR-378, and reduced in cells where miR-378-3p/5p was silenced. In addition, overexpression of miR-378 suppressed the expressions and activities of matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) and MMP-2. Epithelial-mesenchymal transition (EMT) was restrained by overexpression of miR-378, as evidenced by an increase in E-cadherin expression and decrease in N-cadherin and uPA expression. However, knockdown of miR-378-3p/5p produced the opposite results. Moreover, kallikrein-related peptidase 4 (KLK4) was confirmed to be a target gene of miR-378. Overexpression of KLK4 reversed the induced decrease in migration and invasiveness of cells overexpressing miR-378 by upregulating the levels of MMP-9, MMP-2, and N-cadherin, and downregulating the level of E-cadhrin. Finally, the number of metastasis nodules in the lung tissues of nude mice was reduced by overexpression of miR-378, whereas the number of metastases increased with knockdown of miR-378. Taken together, our results suggest that the miR-378-KLK4 axis is involved in the mechanisms behind the migration and invasiveness of OSCC cells. Targeting the miR-378-KLK4 axis may be an effective measure for treating OSCC.

Behavior of squamous cell carcinoma of the floor of the mouth. Is supraomohyoid neck dissection sufficiently safe to manage clinically N0 patients?

AIM: The main aim of the present report is to study the behavior of SCC of the floor of the mouth. MATERIALS AND METHOD: A retrospective analysis was conducted using the records of patients diagnosed with squamous cell carcinoma of the floor of the mouth between 2000 and 2012 in the HUVN. Ninety-three patients with squamous cell carcinoma of the floor of the mouth treated with tumourectomy and selective neck dissection were included in the study. The pattern of distribution of cervical metastases and numerous histological features such as T-stage, N stage, surgical margins, tumor thickness, ECS (extracapsular spread) and vascular invasion were analyzed. RESULTS: Level I was the most affected level, followed by Level II. T stage, tumor thickness, and surgical margins showed a strong relationship with the risk of developing a local or cervical failure at follow-up. Overall survival was 52.7%. T stage, tumor thickness, N stage, recurrence, extracapsular spread, and vascular invasion were also associated with a poor prognosis. CONCLUSIONS: SCC of the floor of the mouth is an aggressive disease even at early stages. Due to the low rate of positive nodes observed at level IV and V in clinically N0 patients, supraomohyoid neck dissection might be considered sufficiently safe in this group.

Análise imunohistoquímica do Gata-3 e Il-4 em carcinomas epidermóides de lábio inferior e língua oral / Immunohistochemical analysis of Gata-3 and Il-4 in squamous cell carcinomas of the lower lip and oral tongue

O carcinoma epidermoide (CE) é a neoplasia maligna mais comum na cavidade oral, sendo o lábio inferior e a língua oral os sítios de maior ocorrência. Como todas as neoplasias malignas, o CE tem etiologia é multifatorial, com forte associação com o tabagismo, etilismo e exposição crônica a radiação solar. Na atualidade muitos estudos têm voltado atenção para o papel da resposta inflamatória no desenvolvimento e crescimento tumoral, principalmente no que se refere à resposta imune celular. O objetivo desse estudo é a analisar a expressão do GATA-3 e da IL-4 em carcinoma epidermoide de lábio inferior (CELI) e de língua oral (CELO). Os casos selecionados foram classificados de acordo com a gradação histológica de malignidade da OMS e a análise imunohistoquímica do GATA-3 e IL-4 em 57 casos de CELI e CELO. Os resultados mostraram significância estatística do GATA-3 no estroma (p < 0,05) dessas lesões e da IL-4 no parênquima (p < 0,01), no estroma (p < 0,01) e no parênquima e estroma juntos (p < 0,01). Revelou também correlação positiva entre a expressão do GATA-3 no parênquima e a IL-4 no parênquima (r = 0.438; p = 0.001), entre o GATA-3 no parênquima e a IL-4 no estroma (r = 0.378; p = 0.004), e entre o GATA-3 no parênquima e a IL-4 no parênquima e estroma (r = 0.348; p = 0.008). Portanto, em todos os casos se observou a presença da resposta Th2, implicando na abertura de um novo horizonte nessa área para novos estudos que possam contribuir para o entendimento dessa resposta no crescimento e desenvolvimento dessas lesões (AU).

Squamous cell carcinoma (SCC) is the most common malignant neoplasm in the oral cavity, with the lower lip and oral tongue being the most frequent sites. Like all malignancies, SCC has etiology is multifactorial, with strong association with smoking, alcoholism and chronic exposure to solar radiation. At present many studies have turned attention to the role of the inflammatory response in the development and tumor growth, mainly with respect to the cellular immune response. The aim of this study is to analyze the expression of GATA-3 and IL-4 in squamous cell carcinoma of the lower lip (SCCLL) and oral tongue (SCCOT). The selected cases were classified according to the WHO histological grading of malignancy and the immunohistochemical analysis of GATA-3 and IL-4 in 57 cases of SCCLL and SCCOT. The results showed statistical significance of GATA-3 in the stromal (p < 0.05) of these lesions and IL-4 in the parenchyma (p < 0.01), in the stroma (p < 0.01) and in the parenchyma and stroma together (p < 0.01). It also showed a positive correlation between the expression of GATA-3 in the parenchyma and IL-4 in the parenchyma (r = 0.438, p = 0.001), between GATA-3 in the parenchyma and IL-4 in the stroma (r = 0.378; p = 0.004), and between GATA-3 in the parenchyma and IL-4 in the parenchyma and stroma (r = 0.348; p = 0.008). Therefore, in all cases, the presence of the Th2 response was observed, implying the opening of new horizons in this area for new studies that may contribute to the understanding of this response in the growth and development of these lesions (AU).

Análise da expressão imunoistoquímica de regy e de proteínas envolvidas na regulação da apoptose em carcinomas epidermoides de língua oral / Analysis of the immunohistochemical expression of regy and of proteins involved in the regulation of apoptosis in oral tongue squamous cell carcinomas

O câncer na cavidade oral é uma das lesões malignas mais frequentes na população mundial. Como o processo de desenvolvimento das neoplasias malignas remete a danos que promovem um desequilíbrio na regulação da divisão e morte celular, nos últimos anos, diversos estudos foram realizados com o intuito de verificar a influência desses danos no comportamento global das células e na evolução da doença. Nesse contexto, pesquisas recentes mostraram que alterações na expressão de REG podem desempenhar um importante papel na progressão tumoral de várias neoplasias malignas, por interferir na regulação da apoptose. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi investigar a expressão imunoistoquímica dos marcadores REG, p53, MDM-2, Bcl-2 e Bax em carcinomas epidermoides de língua (CELs) oral, com a finalidade de promover uma análise comparativa da imunoexpressão destas proteínas com os parâmetros clínico-patológicos de agressividade da lesão, no intuito de identificar se o REG contribui para a progressão do tumor e se interfere na expressão das proteínas relacionadas a apoptose. Para tanto, foram coletadas informações clínicas de 58 pacientes acometidos por CELs. Em seguida, foi realizada análise histopatológica e imunoistoquímica dos marcadores supracitados, em amostras de material biológico parafinado da lesão. Os resultados mostraram que os tumores com metástase nodal e de alto grau histopatológico de malignidade apresentavam percentuais significativamente menores de REG (p<0,05). Em adição, a análise da expressão de p53, MDM-2 e Bax nos diferentes parâmetros clínico-patológicos avaliados nesse trabalho, não revelou diferenças significativas nos percentuais de imunopositividade desses marcadores. Com relação ao Bcl-2, foi visto que tumores de alto grau de malignidade e com óbitos relacionados a doença apresentavam percentual significativamente menor de positividade dessa proteína (p<0,05). Por fim, o teste de correlação de Spearman demonstrou existir fraca correlação positiva, estatisticamente significativa, entre os percentuais de REG e das proteínas MDM-2 e Bcl-2. Baseado nesses achados, pode-se concluir que a redução da expressão de REG parece contribuir para a progressão do CEL oral e pode influenciar na expressão das proteínas relacionadas a regulação da apoptose (AU).

Cancer of the oral cavity is one of the most common malignancies in the world. Since the development of malignant neoplasms is related to damage that causes an imbalance in the regulation of cell division and cell death, many studies have been conducted in recent years to verify the influence of this damage on overall cell behavior and on the progression of the disease. Within this context, recent studies suggest that changes in the expression of REG play an important role in the progression of different malignant tumors by interfering with the regulation of apoptosis. Therefore, the objective of the present study was to investigate the immunohistochemical expression of REG, p53, MDM-2, Bcl-2 and Bax in oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC), correlating the immunoexpression of these proteins with clinicalpathological parameters of tumor aggressiveness, in order to determine whether REG contributes to tumor progression and interferes with the expression of apoptosisrelated proteins. For this purpose, the clinical data of 58 patients with OTSCC were collected and paraffin-embedded tumor specimens were submitted to histopathological analysis and immunohistochemistry using the markers cited above. The results showed significantly higher expression of REG (p<0.05) in low-grade tumors and without lymph node metastases. In addition, comparison of the expression patterns of p53, MDM-2 and Bax according to the clinical-pathological parameters studied revealed no significant differences in the percentage of immunostaining for these markers. Regarding Bcl-2, a significantly lower percentage of immunostaining for this protein was observed in tumors with a high grade of malignancy and tumors associated with deaths related to the disease (p<0.05). Finally, Spearman's correlation test demonstrated a significant weak positive correlation between the percentages of REG and of MDM-2 and Bcl-2. These findings suggest that the reduced expression of REG contributes to the progression of OTSCC and may influence the expression of proteins related to the regulation of apoptosis (AU).

Valor prognóstico de polimorfismos nos genes de reparo do DNA XRCC3 E RAD51 em pacientes com carcinoma epidermóide oral e de orofaringe / Prognostic value of polymorphisms of DNA repair gene RAD51 XRCC3 and in patients with oral squamous cell carcinoma and oropharyngeal

Falhas nos genes responsáveis por reparos no DNA podem influenciar no surgimento de câncer ou afetar a resposta aos tratamentos. Estudos têm demonstrado que a variação na capacidade de reparo do DNA pode ser resultado de polimorfismos funcionais nestes genes, e alguns destes experimentos sugerem que a presença de polimorfismos de nucleotídeos simples (SNPs), em genes de reparo, está relacionada ao desenvolvimento e resposta ao tratamento de vários cânceres, incluindo o Carcinoma Epidermoide Oral (CEO) e o Carcinoma Epidermoide de Orofaringe (CEOR). Nesta pesquisa avaliou-se a frequência de três SNPs em dois genes de reparo do DNA RAD51 172G>T (c.-61 G>T, rs1801321), RAD51 135G>C (c.-98 G>C, rs1801320) e XRCC3 T241M (c. 722 C>T, rs861539) em indivíduos saudáveis (n=130) e indivíduos com CEO e CEOR (n=126) e investigou-se possíveis relações de tais achados com os desfechos clínicos: resposta tumoral ao tratamento com radioterapia e quimioterapia, recidiva, e sobrevida global. Constatou-se frequência alélica e genotípica em equilíbrio. A presença dos SNPs analisados não revelou ser um fator de risco para o desenvolvimento de CEO ou CEOR; contudo, quando associado ao hábito de fumar ou beber, aumentou o risco de desenvolver o câncer de três a cento e cinquenta vezes (p<000,1). A resposta tumoral ao tratamento de radioterapia e quimioterapia foi semelhante nos pacientes com ou sem SNPs. Nenhum polimorfismo demonstrou significância estatística em relação à sobrevida livre de recidiva ou sobrevida global. Os genótipos AA e AC do SNP rs861539 no gene XRCC3, os genótipos CC e CG do SNP rs1801320 e GG e GT do SNP 1801321 no gene RAD51, aumentam o risco do desenvolvimento de carcinoma epidermoide oral e de orofaringe, quando associados ao hábito de beber ou fumar. Os polimorfismos estudados nos genes XRCC3 e RAD51 não estão associados à resposta à radioterapia, sobrevida livre de recidiva ou sobrevida global

Faults in the genes responsible for repairs to the DNA can influence the onset of cancer or affect the response to treatment. This research evaluated the frequency of three single nucleotide polymorphisms (SNPs) in two repair genes DNA RAD51 172g> T (rs1801321), RAD51 135G> C (rs1801320) and XRCC3 T241M (rs861539) in individuals without cancer (n = 130) and patients with oral squamous cell carcinoma (OSC) and carcinoma oropharyngeal squamous (ORSC) (n = 126) and investigated possible relationships of these findings with clinical and pathological data and clinical outcomes: tumor response to radiotherapy and chemotherapy, disease-free survival, and overall survival. It was found that the allele and genotype frequencies were in equilibrium Hard-Weinberg equilibrium. The presence of at least one polymorphic allele in XRCC3 (rs861539) gene is associated with histological grade (WHO) higher (p = 0.007). We observed a higher recurrence rate trend (p = 0.08) and more advanced stage (p = 0.08) in the group that had at least one polymorphic allele of RAD51 gene (rs1801321). The presence of the analyzed SNPs not proved to be a risk factor for the development of CEO or CEOR; however, when combined with smoking or drinking, increased the risk of developing cancer from three to one hundred and fifty times. The tumor response to radiotherapy and chemotherapy was similar in patients with and without SNPs. No polymorphism showed statistical significance in relation to recurrence-free survival or overall survival. We conclude that the presence of at least one polymorphic allele of the SNPs rs861539 in XRCC3 gene, rs1801320 and rs1801321 in the RAD51 gene increase the risk of development of OSC and ORSC, when associated with the habit of drinking or smoking. Polymorphisms studied in XRCC3 and RAD51 genes are not associated with response to radiation therapy, relapse-free survival or overall survival

Estudo in vitro dos efeitos da BMP-2 e do seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em carcinoma epidermóide de língua / In vitro study of the effects of BMP-2 and its antagonist Noggin on cell proliferation and migration in tongue squamous cell carcinoma

O carcinoma epidermóide oral (CEO) representa a neoplasia maligna mais prevalente na cavidade oral e por atingir um grande número de indivíduos, acaba se tornado um relevante problema de saúde pública. Muitos estudos demonstram alterações nos componentes da via BMP em vários tipos de tumores, como os de próstata, cólon, mama, gástricos e CEOs. É do conhecimento atual que essas proteínas podem exercer efeito pró-tumoral em estágios mais avançados do desenvolvimento neoplásico vindo a favorecer a progressão e invasão tumoral. A inibição da via de sinalização da BMP-2, através dos seus antagonistas, tem mostrado resultados positivos de ação antitumoral e que assim, o uso do Noggin pode ser um novo alvo terapêutico contra o câncer. Diante destas evidências e dos escassos trabalhos com BMP-2, Noggin e CEO, o objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da BMP-2 e seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em culturas de células de carcinoma epidermóide de língua humana (SCC25). Foi feita a divisão em três grupos de estudo, um grupo controle, onde as células SCC25 não sofriam tratamento com substância alguma, um grupo BMP-2, no qual as células eram tratadas com 100ng/ml de BMP-2 e um grupo de células que eram tratadas com 100ng/ml de Noggin. Para o ensaio de proliferação e ciclo celular foram estabelecidos três intervalos de tempo (24, 48 e 72 horas).

A atividade proliferativa foi investigada por azul de tripan e a análise do ciclo celular através da marcação por iodeto de propídio em Citometria de fluxo. O potencial de migração/invasão das células SCC25 foi avaliado através da realização de um ensaio de invasão celular utilizando o matrigel em um intervalo de 48 horas. A curva de proliferação revelou maior crescimento celular nas células tratadas com BMP-2 no intervalo de 72 horas (p<0.05) e menor crecimento e viabilidade celular no grupo Noggin. As proteínas recombinantes favoreceram a maior porcentagem das células na fase do ciclo celular Go/G1 com diferença estatisticamente significativa no intervalo de 24 horas (p<0,05). A BMP-2 promoveu uma maior invasão das células estudadas, assim como o seu antagonista Noggin inibiu a invasão das células estudadas (p<0,05). Dessa forma, os resultados indicam que a BMP-2 favorece o fenótipo maligno, pois estimula a proliferação e invasão das células SCC25 e seu antagonista Noggin pode ser uma alternativa terapêutica pois inibiu essas características pró-tumorais. (AU)

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most prevalent malignancy in the oral cavity and reach a large number of individuals, has become an important public health problem. Studies have demonstrated changes in pathway components BMP in various types of cancers as prostate, colon, breast, gastric and OSCCs. Is the current knowledge that these proteins may exert pro-tumor effect in more advanced stages of neoplastic development coming to favor progression and invasion tumor. The inhibition of the signaling pathway BMP-2 through its antagonists, have shown positive results of antitumor activity and use of Noggin may be a novel therapeutic target for cancer. Given this evidence and the few studies with BMP-2, Noggin and OSCC, the objective of this research was to evaluate the effect of BMP-2 and its antagonist Noggin on proliferation and migration cell in line of cell cultures of human tongue squamous cell carcinoma (SCC25). The study was divided in three groups, a control group, where SCC25 cells suffered no treatment, a BMP-2 group, in which cells were treated with 100ng/ml of BMP-2 and a group of cells that were treated with 100ng/ml of Noggin.

For the proliferation assay and cell cycle were established three time intervals (24, 48 and 72 hours). Proliferative activity was investigated by trypan blue and cell cycle analysis by staining with propidium iodide flow cytometry. The potential for migration / invasion of SCC25 cells was performing by a cell invasion assay using Matrigel in a 48-hour interval. The proliferation curve showed a higher proliferation in cells treated with BMP-2 in 72 hours (p < 0.05), and lower overgrowth and cell viability in Noggin group. Recombinant proteins favored a greater percentage of cells in cell cycle phase Go/G1 with a statistically significant difference in the interval of 24 hours (p < 0.05). BMP- 2 produced a greater invasion of cells studied as well as its antagonist Noggin inhibits invasion of cells (p < 0.05). Thus, these results indicate that BMP-2 promotes malignant phenotype, dues stimulates proliferation and invasion of SCC25 cells and, its antagonist Noggin may be an alternative treatment, due to inhibit the tumor progression. (AU)

Polymorphisms in methylenetetrahydrofolate reductase and cystathionine beta-synthase in oral cancer - a case-control study in southeastern Brazilians.

INTRODUCTION: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a serious public health problem, due to its high mortality rate and worldwide rising incidence. OSCC susceptibility is mediated by interactions between genetic and environmental factors. Studies suggest that genetic variants encoding enzymes involved in folate metabolism may modulate OSCC risk by altering DNA synthesis/repair and methylation process. OBJECTIVE: The goals of this study were to evaluate the association of three genotypic polymorphism (MTHFR C677T, MTHFR A1298C and CBS 844ins68) and oral cancer risk in southeastern Brazilians and evaluate the interactions between polymorphisms and clinical histopathological parameters. METHODS: This case-control study included 101 cases and 102 controls in the state of Espírito Santo, Brazil. MTHFR genotyping was done by PCR-RFLP (polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism) and CBS genotyping by PCR (polymerase chain reaction) analysis. RESULTS: MTHFR C677T polymorphism was associated with lymph node involvement. Genotype CT+TT acted as a protective factor. MTHFR A1298C AC+CC genotype was associated with tumor differentiation, and possibly with a better prognosis. In risk analysis, no correlation was observed between genotypes and OSCC. CONCLUSION: We concluded that MTHFR C677T, MTHFR A1298C and CBS 844ins68 polymorphisms were not associated with OSCC risk in southeastern Brazilians; however, we suggest a prognosis effect associated with MTHFR C677T and A1298C polymorphisms in OSCC.

Associação da imunoexpressão das proteínas XRCC1, TFIIH E XPF com características clinicopatológicas e sobrevida em carcinoma epidermoide de língua oral / Association of immunoexpression of XRCC1, TFIIH and XPF proteins with clinicopathological characteristics and survival in oral tongue squamous cell carcinoma

Sistemas de reparo do DNA, genes e proteínas, são essenciais para manutenção da integridade do genoma, evitando graves doenças como o câncer. Desrregulação na expressão destas proteínas vem sendo associado tanto ao risco do desenvolvimento, como na evolução de variados cânceres humanos com destaque para o carcinoma epidermoide oral. O objetivo deste trabalho foi analisar a imunoexpressão das proteínas de reparo do DNA, XRCC1, THIIF e XPF em carcinoma epidermoide de língua oral (CELO) e investigar associação com parâmetros clínicos, histopatológicos, de desfecho e sobrevida em cinco anos. Setenta e quatro casos de CELO foram analisados por meio da técnica da imuno-histoquímica de forma semiquantitativa. Observou-se alta expressão das proteínas pesquisadas nas células parenquimatosas, identificando associação significativa da elevada expressão de XRCC1 com melhor estadiamento clínico (p=0,02). A regressão de Cox revelou tamanho do tumor (p<0,01), comprometimento linfonodal (p=0,04), estágio do tumor (p=0,02) e profundidade de invasão >4mm (p=0,05) como fatores prognósticos para CELO. Os resultados deste experimento sugerem que as proteínas XRCC1, TFIIH e XPF participam do processo de tumorigênese, entretanto a imunoexpressão das mesmas não pode ser utilizada como indicador independente de prognóstico para CELO (AU).

DNA repair systems, genes and proteins are essential for genome integrity maintenance, avoiding serious diseases such as cancer. Deregulation in the expression of those proteins has been associated with both the risk of development and evolution of various human cancers, including oral squamous cell carcinoma. The purpose of this study was to analyze the immunoreactivity of the DNA repair proteins XRCC1, THIIF and XPF in oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC) and to investigate its association with clinical and histopathological parameters, outcome and 5-year survival rate. Seventy-four cases of OTSCC were analyzed semi-quantitatively through immunohistochemistry. We observed that DNA repair proteins were highly expressed in parenchymal cells; however, we only observed a significant association between XRCC1 high expression and better clinical staging (p=0,02). Cox regression showed that tumor size (p<0,01), lymph node involvement (p=0,04), tumor stage (p=0,02) and depth of invasion> 4mm (p=0,05) were prognostic factors. The results of this experiment suggest that XRCC1, TFIIH and XPF participate in the tumorigenic process, however, their immunoexpression may not be used as an independent prognostic indicator for OTSCC (AU).

Estudo in vitro dos efeitos da BMP-2 e do seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em carcinoma epidermóide de língua / In vitro study of the effects of BMP-2 and its antagonist Noggin on cell proliferation and migration in squamous carcinoma of the tongue

O carcinoma epidermóide oral (CEO) representa a neoplasia maligna mais prevalente na cavidade oral e por atingir um grande número de indivíduos, acaba se tornado um relevante problema de saúde pública. Muitos estudos demonstram alterações nos componentes da via BMP em vários tipos de tumores, como os de próstata, cólon, mama, gástricos e CEOs. É do conhecimento atual que essas proteínas podem exercer efeito pró-tumoral em estágios mais avançados do desenvolvimento neoplásico vindo a favorecer a progressão e invasão tumoral. A inibição da via de sinalização da BMP-2, através dos seus antagonistas, tem mostrado resultados positivos de ação antitumoral e que assim, o uso do Noggin pode ser um novo alvo terapêutico contra o câncer. Diante destas evidências e dos escassos trabalhos com BMP-2, Noggin e CEO, o objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da BMP-2 e seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em culturas de células de carcinoma epidermóide de língua humana (SCC25). Foi feita a divisão em três grupos de estudo, um grupo controle, onde as células SCC25 não sofriam tratamento com substância alguma, um grupo BMP-2, no qual as células eram tratadas com 100ng/ml de BMP-2 e um grupo de células que eram tratadas com 100ng/ml de Noggin. Para o ensaio de proliferação e ciclo celular foram estabelecidos três intervalos de tempo (24, 48 e 72 horas). A atividade proliferativa foi investigada por azul de tripan e a análise do ciclo celular através da marcação por iodeto de propídio em Citometria de fluxo. O potencial de migração/invasão das células SCC25 foi avaliado através da realização de um ensaio de invasão celular utilizando o matrigel em um intervalo de 48 horas. A curva de proliferação revelou maior crescimento celular nas células tratadas com BMP-2 no intervalo de 72 horas (p<0.05) e menor crecimento e viabilidade celular no grupo Noggin. As proteínas recombinantes favoreceram a maior porcentagem das células na fase do ciclo celular Go/G1 com diferença estatisticamente significativa no intervalo de 24 horas (p<0,05). A BMP-2 promoveu uma maior invasão das células estudadas, assim como o seu antagonista Noggin inibiu a invasão das células estudadas (p<0,05). Dessa forma, os resultados indicam que a BMP-2 favorece o fenótipo maligno, pois estimula a proliferação e invasão das células SCC25 e seu antagonista Noggin pode ser uma alternativa terapêutica pois inibiu essas características pró-tumorais. (AU)

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most prevalent malignancy in the oral cavity and reach a large number of individuals, has become an important public health problem. Studies have demonstrated changes in pathway components BMP in various types of cancers as prostate, colon, breast, gastric and OSCCs. Is the current knowledge that these proteins may exert pro-tumor effect in more advanced stages of neoplastic development coming to favor progression and invasion tumor. The inhibition of the signaling pathway BMP-2 through its antagonists, have shown positive results of antitumor activity and use of Noggin may be a novel therapeutic target for cancer. Given this evidence and the few studies with BMP-2, Noggin and OSCC, the objective of this research was to evaluate the effect of BMP-2 and its antagonist Noggin on proliferation and migration cell in line of cell cultures of human tongue squamous cell carcinoma (SCC25). The study was divided in three groups, a control group, where SCC25 cells suffered no treatment, a BMP-2 group, in which cells were treated with 100ng/ml of BMP2 and a group of cells that were treated with 100ng/ml of Noggin. For the proliferation assay and cell cycle were established three time intervals (24, 48 and 72 hours). Proliferative activity was investigated by trypan blue and cell cycle analysis by staining with propidium iodide flow cytometry. The potential for migration / invasion of SCC25 cells was performing by a cell invasion assay using Matrigel in a 48-hour interval. The proliferation curve showed a higher proliferation in cells treated with BMP-2 in 72 hours (p < 0.05), and lower overgrowth and cell viability in Noggin group. Recombinant proteins favored a greater percentage of cells in cell cycle phase Go/G1 with a statistically significant difference in the interval of 24 hours (p < 0.05). BMP- 2 produced a greater invasion of cells studied as well as its antagonist Noggin inhibits invasion of cells (p < 0.05). Thus, these results indicate that BMP-2 promotes malignant phenotype, dues stimulates proliferation and invasion of SCC25 cells and, its antagonist Noggin may be an alternative treatment, due to inhibit the tumor progression. (AU)

Estudo in vitro dos efeitos da BMP-2 e do seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em carcinoma epidermóide de língua / In vitro study of the effects of BMP-2 and its antagonist Noggin on cell proliferation and migration in tongue squamous cell carcinoma

O carcinoma epidermóide oral (CEO) representa a neoplasia maligna mais prevalente na cavidade oral e por atingir um grande número de indivíduos, acaba se tornado um relevante problema de saúde pública. Muitos estudos demonstram alterações nos componentes da via BMP em vários tipos de tumores, como os de próstata, cólon, mama, gástricos e CEOs. É do conhecimento atual que essas proteínas podem exercer efeito pró-tumoral em estágios mais avançados do desenvolvimento neoplásico vindo a favorecer a progressão e invasão tumoral. A inibição da via de sinalização da BMP-2, através dos seus antagonistas, tem mostrado resultados positivos de ação antitumoral e que assim, o uso do Noggin pode ser um novo alvo terapêutico contra o câncer. Diante destas evidências e dos escassos trabalhos com BMP-2, Noggin e CEO, o objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da BMP-2 e seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em culturas de células de carcinoma epidermóide de língua humana (SCC25). Foi feita a divisão em três grupos de estudo, um grupo controle, onde as células SCC25 não sofriam tratamento com substância alguma, um grupo BMP-2, no qual as células eram tratadas com 100ng/ml de BMP-2 e um grupo de células que eram tratadas com 100ng/ml de Noggin. Para o ensaio de proliferação e ciclo celular foram estabelecidos três intervalos de tempo (24, 48 e 72 horas)...

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most prevalent malignancy in the oral cavity and reach a large number of individuals, has become an important public health problem. Studies have demonstrated changes in pathway components BMP in various types of cancers as prostate, colon, breast, gastric and OSCCs. Is the current knowledge that these proteins may exert pro-tumor effect in more advanced stages of neoplastic development coming to favor progression and invasion tumor. The inhibition of the signaling pathway BMP-2 through its antagonists, have shown positive results of antitumor activity and use of Noggin may be a novel therapeutic target for cancer. Given this evidence and the few studies with BMP-2, Noggin and OSCC, the objective of this research was to evaluate the effect of BMP-2 and its antagonist Noggin on proliferation and migration cell in line of cell cultures of human tongue squamous cell carcinoma (SCC25). The study was divided in three groups, a control group, where SCC25 cells suffered no treatment, a BMP-2 group, in which cells were treated with 100ng/ml of BMP-2 and a group of cells that were treated with 100ng/ml of Noggin...

Estudo imunoistoquímico da queilite actínica, carcinoma epidermóide de lábio e carcinoma epidermóide intrabucal / Actinic cheilitis immunohistochemical study, lips and intraoral squamous cell carcinoma

O presente projeto de pesquisa objetiva avaliar a marcação de mastócito (MCs)s, linfócitos T CD4+ e, linfócitos T CD8+ na queilite actínica (QA), carcinoma epidermóide (CE) de lábio e CE de língua. Investigamos se há diferença na proporção dos MCs, T CD4+ e T CD8+, levando em consideração os graus de displasia epitelial da QA bem como os graus de diferenciação celular do CE de lábio e CE de língua. Estudamos ainda alterações arquiteturais e citológicas da QA e os graus de diferenciação celular CE de lábio e CE de língua. A amostra foi composta de 30 casos de QA em lábio inferior (grupo 1), 30 de CE primário em lábio inferior (grupo 2), 30 de CE primário em língua (grupo 3) com diagnóstico clínico e histopatológico e 10 casos de grupo controle. As peças foram coradas histoquimicamente com hematoxicilina e eosina H&E, anticorpos anti-CD4, anti-CD8 e triptase. Todos os casos foram avaliados em toda sua extensão, em microscópico de luz em 100x, 200x e 400x. A marcação de T CD4+ na QA e grupo controle subepitelial foi de 9,2 ± 4,64 e 5,2 ± 3,25 respectivamente; CL e CB intraepitelial foi de 11,40 ± 7,06 e 18,33 ± 17,36, e CL e CB estroma foi 9,70 ± 5,59 e 15,80 ± 15,11 respectivamente. A marcação de T CD8+ na QA e grupo controle subepitelial foi de 8,00 ± 4,64 e 4,50 ± 3,25 respectivamente; CL e CB intraepitelial foi de 21,20 ± 35,51 e 17,67 ± 17,17, e CL e CB estroma foi 17,17 ± 22,91 e 17,63 ± 12,50 respectivamente. A marcação de MCs na QA e grupo controle subepitelial foi de 10,37 ± 4,67 e 7,80 ± 4,07 respectivamente; CL e CB intraepitelial foi de 11,40 ± 7,06 e 10,43 ± 5,26, e CL e CB estroma foi 9,70 ± 5,59 e 12,17 ± 5,93 respectivamente. O tratamento estatístico foi realizado pelos testes de Kruskal-Wallis x Mann Whitney, com nível de significância de 5%. Houve diferença estatisticamente significante (p= 0,0001): na QA leve X CB bd, QA mod X CB md, QA bg X QA sub; QA bg X CL ie; QA bg X CL estro, QA alto x CL estro e QA bg X CB estro, na marcação de T CD4+. ..

The aim of the present research was to evaluate the expression of mast cells (MCs)s, CD4+ T lymphocytes and CD8+ T lymphocytes in actinic cheilitis (AQ), squamous cell carcinoma (SCC) of lip and SCC of tongue. We investigated eventual differences in the proportion of the MCs, CD4+ T and CD8+ T cells taking into consideration the degrees of the AQ epithelial dysplasia as well as the degrees of cellular differentiation of SCC of lip and SCC of tongue. We also examined the AQ architectural and cytological changes and the cellular differentiation of SCC of lip and SCC of tongue. Sampling consisted of 30 cases of AQ in lower lip (group 1), 30 cases of primary SCC in lower lip (group 2), 30 primary SCC in tongue (group 3) with clinical and histopathological diagnosis and 10 cases of control group. The specimens were histochemically stained with hematoxicilina and H & E eosin, anti-CD4, and anti-CD8 antibodies and tryptase. All cases were fully evaluated, under a light microscope at 100x, 200x and 400x. The CD4+ T expression in AQ and sub epithelial control group were 9,2 ± 4,64 and 5,2 ± 3,25, respectively; intraepithelial SCC of lower lip and SCC of tongue were 11,40 ± 7,06 and 18,33 ± 17,36, and stroma of SCC of lower lip and stroma of SCC of tongue were 9,70 ± 5,59 and 15,80 ± 15,11 respectively. Expression of CD8+ T in AQ and sub epithelial control group were 8,00 ± 4,64 and 4,50 ± 3,25 respectively; intraepithelial SCC of lower lip and SCC of tongue were 21,20 ± 35,51 e 17,67 ± 17,17, and stroma of SCC of lower lip and stroma of SCC of tongue were 17,17 ± 22,91 and 17,63 ± 12,50 respectively. MCs expression in AQ and sub epithelial control group were 10,37 ± 4,67 and 7,80 ± 4,07 respectively; intraepithelial SCC of lower lip and SCC of tongue were 11,40 ± 7,06 and 10,43 ± 5,26, and stroma of SCC of lower lip and stroma of SCC of tongue were 9,70 ± 5,59 and 12,17 ± 5,93 respectively.Statistical analysis was performed through Kruskal-Wallis x ...

Expressão imuno-histoquímica do CD8, FOXP3, TGF B, TNF a e NFK-B em displasias epiteliais e carcinomas epidermóides orais / Imuno-histoquímica expression of the CD8, FOXP3, TGF B, TNF and the NFK-B in epithelial displasias and carcinomas epidermóides you pray

A Displasia Epitelial Oral (DEO) é a lesão que precede ou coexiste com o Carcinoma Epidermóide Oral (CEO), apresentando alterações moleculares e/ou histológicas semelhantes. As divergências sobre o potencial de malignização das DEO e o papel da inflamação nestes processos têm dificultado o diagnóstico precoce e a avaliação da agressividade dos CEO. Sendo assim, tornou-se objetivo deste estudo avaliar o papel da inflamação nas carcinogênese oral e agressividade tumoral. Para isso foi realizado estudo morfológico em 20 casos de DEO e 40 casos de CEO para detectar o potencial de malignização das DEO e o Grau Histológico de Malignidade (GHM) dos CEO, analisando as massas superficiais para avaliação do dismorfismo e o front invasivo para avaliação do crescimento tumoral; e imuno-histoquímico, utilizando os anticorpos anti-CD8, anti-FOXP3, anti-TGFB, anti-TFN-a e anti-NF-kB, para comparar a expressão dos mesmos com o tipo de lesão, grau histológico e intensidade do infiltrado inflamatório. Os resultados foram estatisticamente para os parâmetros, maturidade celular (p=0,0001), presença de massas (p=0,038) e dismorfismo (p=0,037), quando associados aos GHM. Ao comparar a expressão...

Estudo da angiogênese pelo CD105 e FvW no carcinoma epidermóide oral e sua relação com o estadiamento clínico do tumor / Study of angiogênese for the CD105 and FvW in the verbal carcinoma epidermóide and its relation with the clinical estadiamento of the tumor

Nesta pesquisa buscou-se avaliar a expressão imunoistoquímica dos anticorpos CD105 e FvW na angiogênese do Carcinoma Epidermóide Oral (CEO), correlacionando-o com o estadiamento clínico pelo sistema TNM, visando uma melhor compreensão do seu comportamento biológico e utilização como indicador de prognóstico. A amostra foi composta por 30 casos de CE, sendo 10 de assoalho bucal, 10 da região retromolar e 10 de língua, além de 10 casos de granuloma piogênico, integrantes do grupo controle. Os resultados desta pesquisa mostraram que as médias da MVC foram correspondentemente mais elevadas no grupo do granuloma piogênico (CD105 = 57,26 vasos e FvW = 39,64) do que no grupo do CE (CD105 = 10,09 e FvW = 12,20) e as diferenças se revelaram estatisticamente significantes entre os grupos para cada um dos biomarcadores angiogênicos (p=0,002 para o CD105 e p<0,001 para o FvW ). O CD105 se mostrou com melhor positividade no granuloma piogênico (média = 57,26 vasos) e, para o CE, o FvW foi o que apresentou maior marcação (média = 12,20 vasos). Com relação ao CE, a faixa etária mais acometida foi entre 51 e 70 anos (n=14; 46,7%), apresentando uma MVC representativa para ambos os marcadores. Não se comprovou diferença estatisticamente significante entre os sexos para nenhum dos marcadores (p=0,967 para o CD105 e p=0,744 para o FvW). A média do CD105 foi bem mais elevada entre os pacientes com estadiamento T3 e T4 (17,13) e menos elevada entre os pacientes com estadiamento N+ (6,36). Quando se avaliou o FvW, a média foi mais elevada no grupo dos pacientes com T1 e T2 (12,23), sendo mais baixa nos pacientes com T3 e T4 (12,10), porém sem diferença estatisticamente significante. Em relação à localização anatômica, comprovou-se diferença estatisticamente significante entre as localizações assoalho bucal e retromolar (p=0,013) para o marcador FvW. Portanto, este estudo sugere que a marcação do CD105 na angiogênese do CEO, ao contrário de outros tipos de neoplasias malignas, pode não estar correlacionada com o prognóstico e agressividade do tumor, enquanto que o FvW se mostrou um anticorpo mais efetivo na marcação desta lesão (AU).

The purpose of this study was to assess the immunohistochemical expression of CD105 and FvW antibodies in the angiogenesis of oral epidermoid carcinoma (OEC), correlating it with the TNM clinical staging system, seeking a better understanding of its biological behavior and use as an indicator of prognosis.The sample consisted of 30 epidermoid carcinoma (EC) cases, 10 of the floor of the mouth, 10 of the retromolar region and 10 of the tongue, in addition to 10 cases of pyogenic granuloma, which made up the control group. The results showed that mean microvessel counts (MVC) were correspondingly higher in the pyogenic granuloma group (CD105 = 57.26 vessels and FvW = 39.64) than in the EC group (CD105 = 10.09 and FvW = 12.20) and that the differences were statistically significant between the groups for each of the angiogenic biomarkers (p = 0.002 for CD105 and p< 0.001 for FvW). CD105 had better positivity in the pyogenic granuloma group (mean = 57.26 vessels) and for EC, FvW had the highest expression (mean = 12.20 vessels). With respect to EC, the most affected age group was between 51 and 70 years (n = 14; 46.7%), with a representative MVC for both markers. No statistically significant difference was found between the sexes for any of the markers (p = 0.967 for CD105 and p = 0.744 for FvW). Mean CD105 levels were much higher in patients with stage T3 and T4 (17.13) and lower in those with stage N+ (6.36). Mean FvW levels were higher in the patients with stage T1 and T2 (12.23) and lower in patients with T3 and T4 (12.10), but without a statistically significant difference. In regard to anatomic location, a statistically significant difference was observed between FvW sites, with a statistically significant difference between floor of the mouth cases and those located in the retromolar region (p = 0.013). Therefore, this study suggests that CD105 expression in OEC angiogenesis, in contrast to other types of malignant neoplasias, may not be correlated with prognosis and tumor aggressiveness, whereas FvW was a more effective antibody for staining this lesion (AU).

Avaliação da expressão da BMP -2/4 e BMPR-IA em carcinoma epidermóide oral metastático e não metastático / Evaluation of the expression of BMP-2/4 and BMPR-IA in carcinoma epidermóide verbal not metastático metastático and

A expressão das proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) está alterada em vários cânceres humanos. A BMP-2/4 e o BMPR-IA foram recentemente encontrados superexpressos em lesões malignas e pré-malignas de alto risco em epitélio oral. Este estudo analisou a expressão da BMP-2/4 e seu receptor BMPR-IA em 23 espécimes de Carcinoma Epidermóide Oral (CEO), utilizando a imuno-histoquímica. O grupo controle constou de 10 casos de Hiperplasia Fibro-epitelial da mucosa oral. O grupo experimental foi constituído por 16 casos de CEO não metastático e 7 casos de CEO metastático. Utilizou-se o parâmetro presença ou ausência de metástase nodal para avaliar o prognóstico da doença. Os resultados demonstraram imunorreatividade fraca para a BMP-2/4 e o BMPR-IA em todos os espécimes do grupo controle. No grupo experimental com metástase, a BMP-2/4 exibiu forte expressividade (71,4%), enquanto que o BMPR-IA mostrou fraca expressão (85,7%). No grupo experimental sem metástase, evidenciou-se forte expressão para a BMP-2/4 (62,5%) e para o BMPR-IA (100%). Encontrou-se significância estatística para a associação entre o prognóstico do CEO e a intensidade de marcação da BMP-2/4 (p=0,002). Para o BMPR-IA não houve significância estatística à sua associação com o prognóstico da doença (p<0,001), em função do tamanho da amostra. Portanto, os resultados sugerem que a fraca expressividade do BMPR-IA associada à forte expressão da BMP-2/4, no grupo experimental com metástase, tem relevância prognóstica, já que a perda de sensibilidade às BMPs, através da perda de expressão de seus receptores pode ser indicativo de desenvolvimento de metástase em CEO (AU).

The expression of bone morphogenetic proteins (BMPs) is altered in a variety of human canceres. The BMP-2/4 and BMPR-IA were recently shown to be overexpressed in high-risk premalignant and malignant lesions of oral epithelium. The present study analysed the expression of BMP-2/4 and BMPR-IA in Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) such as their implications in disease prognostic using immunohistochemistry. Ten cases of Oral Fibro- epithelial Hiperplasia were selected as a control group. The experimental group included 16 cases of OSCC without metastases and 7 cases of OSCC metastatic. The presence or absence of nodal metastases was used as parameter to evaluated the disease prognostic. The results demonstrated weak immunoreactivity for BMP-2/4 and BMPR-IA in every case of the control group. In the cases of OSCC with metastases an overexpression of BMP-2/4 (71,4%) was observed while the BMPR-IA showed weak expression (85,7%). In the cases of OSCC without metastases BMP-2/4 (62,5%) and BMPR-IA showed strong immunostaining standing out an overexpression of the receptor in all the specimens. Observed statistical significance for correlation between the oral cancer prognostic and the staining intensity of the BMP-2/4 (p=0,002). There wasn't statistical significance for association between the staining intensity of the BMPR-IA and the disease prognostic (p<0,001). In conclusion, this findings suggest that the overexpression of BMP-2/4 associated with the loss of expression of the BMPR-IA in OSCC metastatic has prognostic relevance, as the loss of sensitivity to BMPs can be an indicative of metastases development in OSCC (AU).

Expressão imuno-hisquimica da E-caderina e do Cd44v6 em carcinoma epidermóide de lábio inferior e língua / Imuno-histhochemical expression of the E-caderina and the Cd44v6 in epidermóide carcinoma of inferior lip and language

Este trabalho teve como objetivo verificar, através da técnica da estreptoavidina-biotina, a expressão imuno-histoquímica das proteínas E-caderina e CD44v6 em 15 espécimes de carcinoma epidermóide de lábio inferior e 15 de língua, com variada gradação histológica de malignidade, a fim de estabelecer uma possível relação entre a expressão das referidas proteínas e a localização anatômica da lesão, metástase, assim como com a gradação histológica de malignidade proposta por Bryne (1998). A análise estatística demonstrou que não houve associação significativa entre a localização da lesão e os escores de malignidade, entretanto, houve uma correlação significativa entre os parâmetros de gradação histológica de malignidade e o escore total de malignidade, sendo que o parâmetro grau de ceratinização apresentou a maior correlação (r = 0,844). Levando-se em consideração a localização anatômica das lesões, não houve diferença significativa entre o padrão de expressão e a quantidade de células imunopositivas para E-caderina e CD44v6. Em se tratando da variável metástase, também não houve diferença significativa entre o padrão de expressão e a quantidade de células imunopositivas para as proteínas avaliadas. Entretanto, ressalta-se que foi observada uma diferença estatisticamente significativa em relação aos escores de malignidade, sendo que o escore baixo apresentou os maiores valores para o padrão de expressão e a quantidade de células imunopositivas para a E-caderina e o CD44v6. Uma correlação estatisticamente significativa e negativa entre o padrão de expressão e a quantidade de células imunopositivas para a E-caderina e o CD44v6 e o escore total de malignidade foi observada. Portanto, com base nestes resultados, conclui-se que a expressão dos marcadores imuno-histoquímicos E-caderina e CD44v6 não constituiu fator indicativo de maior agressividade morfológica para os pacientes portadores de carcinomas epidermóides de lábio inferior e de língua (AU).

The objective of this study was perform, by the streptoavidin-biotin technique, an immunohistochemical analysis of the E-cadherin and CD44v6 in 15 lower lip squamous cell carcinomas and 15 of tongue, with varied histologic gradation of malignidade, in order to establish a possible relation between the expression these proteins and the anatomical localization of the lesions, metastasis, as well as with the Bryne`s histolologic grading of malignancy system. It was not observed significant statistical association between the localization of the lesions and the malignancy score, however, had a significant correlation between the histologic parameters of malignancy gradation and the total score of malignancy, being that the parameter degree of keratinization presented the highest correlation (r = 0,844). Taking in consideration the anatomical localization of the lesions, it was not significant difference between the profile of expression and the amount of immunopositive cells for E- caderina and CD44v6. To the metastasis variable, also it was not observed significant difference between the profile of expression and the amount of immunopositive cells for evaluated proteins. However, it was observed a statistical significant difference in relation to the scores of malignancy, being that the low score presented the highest values for the profile of expression and the amount of immunopositive cells for the E-caderina and the CD44v6. It was observed a statistically significant and negative correlation between the expression profile, the amount of E-cadherin and CD44v6 immunopositive cells and the total score of malignancy. Therefore, based in the results of this study, it was concluded that the expression of the immunohistochemical markers E-caderina and CD44v6 did not constitute histological indicator of aggressiveness for the patients with lower lip and tongue squamous cell carcinomas (AU).

Estudo da detecção do DNA do papiloma vírus humano (HPV) e da expressão imuno-histoquímica de proteína do ciclo celular no carcinoma epidermóide oral / Study of DNA detection of human papillomavirus (HPV) and immunohistochemical expression of cell cycle protein in oral squamous cell carcinoma

O carcinoma epidermóide oral é a neoplasia maligna mais freqüente da cavidade oral e o papilomavírus humano (HPV) parece ter um relevante papel na indução desta lesão. Neste trabalho investigou-se o DNA do HPV e tipos virais em 90 casos de carcinoma epidermóide oral (CEO). Realizou-se também uma análise comparativa entre os grupos de CEO com DNA do HPV e sem o DNA do vírus, empregando-se os marcadores do ciclo celular p2l e pRb, a fim de estabelecer possível correlação entre a expressão imuno-histoquímica dessas proteínas e a infecção pelo HPV. O DNA foi extraído de tecido emblocado em parafina e amplificado por PCR (reação em cadeia da polimerase) com um par de primers designados PC03+ e PC04+ para um fragmento do gene da ~-globina humana. Posteriormente, realizou-se PCR para detecção do DNA de HPV utilizando-se um par de primers genéricos designados GP5+ e GP6+. A tipagem viral foi realizada pela hibridização dot blot. No método imuno-histoquímico utilizou-se a técnica da streptavidina-biotina com um painel de anticorpos monoclonais para as proteínas p2l e pRb. Dos 88 casos positivos para o gene da ~-globina humana, em 26 (29,5%) foi detectado o DNA do HPV. Não houve associação significativa entre o HPV e as variáveis idade e sexo dos pacientes e localização anatõmica da lesão. O tipo viral prevalente foi o HPV 18 (80,8%). Quanto à análise imuno-histoquímica, foi observada associação estatisticamente significativa entre a presença do HPV e a expressão imuno histoquímica de pRb (p=0,044), entretanto, não houve qualquer diferença estatisticamente significativa entre a expressão da proteína p2l e a presença do vírus (p =0,416). Pôde-se concluir que o baixo percentual de detecção do DNA do HPV no carcinoma epidermóide oral no presente trabalho, sugere uma possível participação do HPV no desenvolvimento e progressão de apenas um subgrupo dessas lesões.

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most common malignancy in oral cavity and human papillomavirus (HPV) may have an important role in its development. The aim of this experiment was to investigate the HPV DNA and viral types in 90 cases of OSCC. Moreover, a comparative analysis between the cases of OSSC with and without HPV DNA was performed by using cell cycle markers p21 and pRb in order to detect a possible correlation of these proteins and HPV infection. DNA was extracted from paraffin embedded tissue and amplified by PCR (polymerase chain reaction) with primers PCO3+ e PCO4+ for a fragment of human β-globin gene. After this procedure, PCR for HPV DNA detection was realized using a pair of generic primers GP5+ e GP6+. Immunohistochemical study was performed by streptoavidin-biotin technique and antibodies against p21 and pRb proteins were employed. Eighty-eight cases were positive for human β-globin gene and HPV DNA was found in 26 (29.5%) of then. It could not be detected significant correlation between HPV and age, sex and anatomical sites of the lesion. The most prevalent viral type was HPV 18 (80.8%). Regarding the immunohistochemical analysis, it was detected significant association between HPV presence and pRb immunoexpression (p=0,044), nevertheless, the same was not observed in relation to p21 protein (p =0,416). It can be concluded that the low detection of HPV DNA in OSCC by the present experiment suggests a possible role of the virus in the development and progression in just a subset of this disease.